一、 儀器介紹

實驗目的：

本試驗是一項生殖細胞致突變試驗,用來檢測受試物對整體哺乳動物生殖細胞的遺傳損（sǔn）傷,進一（yī）步確證體外（wài）試驗或其他試驗係統獲得的陽性結果,以評價受試物（wù）能否引起顯性致死突變。

實驗概述：

哺乳動物發育中的精子在物理或化學因素作用下,發生（shēng）染色體（tǐ）損傷,從而（ér）使受精卵在發育中死亡引起顯性致死的染色體損傷主要為染色（sè）體斷裂。顯性致死的主要表現是受（shòu）精卵（luǎn）著床前丟失或著床（chuáng）後胚

胎（tāi）早期（qī）死亡。通過適當的途徑使雄性動（dòng）物接觸受試物,然後與未經染毒且未交配（pèi）過（guò）的雌性動物交配,交配結束後,取出雌（cí）性動物。雌性動（dòng）物（wù）於妊娠後半期處死,剖開腹腔,取出子宮,檢査兩（liǎng）側子宮內的胚胎植入數（著床數）、早死胎、晚死胎和活胎數。雄性動（dòng）物每間隔一定時間再（zài）與另一批未經染毒且未交配過的雌性（xìng）動物（wù）交配（pèi）,如（rú）此共進行數批,以保證覆蓋一個精子周期。

應用範圍（wéi）

應用於科研、農業、衛生、教育、霧霾狀（zhuàng）態可吸入顆粒染毒效果研究等各個領域

符合標（biāo）準：

GB/T 15670.18-2017《農藥（yào）登記毒理學試驗（yàn）方法第18 部分:齧齒類動物顯性致死試驗》

二、試驗流程

1）實驗動物（wù）：

物種: 通（tōng）常選用性（xìng）成熟的健（jiàn）康雄性（xìng）大鼠或小鼠（shǔ）（如SD大鼠（shǔ）、CD-1小鼠）

數量: 每（měi）組（zǔ）至少15隻雄鼠，設多個劑量組（zǔ）和陰性/陽性對照組。

雌鼠: 需未交配過（guò）的健康雌鼠，用於（yú）與雄鼠交配。

2）給藥劑量分（fèn）組:

至少設3個劑量組，高劑量應（yīng）出現輕微毒性（如體重減輕）。

陰性對照組如體重減輕（溶劑對照（zhào））和陽性（xìng）對照組（如環磷（lín）酰（xiān）胺（àn）、絲裂黴素C等（děng）已知致突變劑）

給藥方式:通常為經口灌胃，連續給藥（yào）5~7天（覆蓋精子發（fā）生周期不同階（jiē）段）

3）交配程序

交配安排:雄鼠給藥後，按周次與未處理雌鼠（shǔ）交配（每周更換一批雌鼠，共5~6批），以覆蓋精子（zǐ）發生全周期（精原細胞一精子）。

交配比例:通常1雄:2雌，每日檢查陰（yīn）栓（交配證據）

4）觀察（chá）指標：

胚（pēi）胎存活分析

雌鼠妊娠中期解剖，計數黃體數、著床數、活胎數和死胎數。

計算（suàn）顯性致死率:

其他指標: 雄鼠體重、睾丸重量、精子質量等,

5）結果評價：

陽性結果:顯性致死率顯著升（shēng）高（如劑量依賴（lài）性（xìng）增加，或某（mǒu）批交配周期異常），提示受試農藥可能誘發生殖細胞遺傳損傷。

陰性結果:需結合其他遺傳毒性試驗綜合評估。