儀（yí）器介紹

實驗（yàn）目的：

檢測受試物是否引起哺乳動物骨髓細胞染色體畸變,以評價受試物致突變（biàn）的（de）可能性

實驗概述：

染色體（tǐ）是細胞核中具有特殊結構和遺傳功能的小體,當（dāng）化學物質作用於細胞周（zhōu）期（qī）G1期和S期時誘發染（rǎn）色體型畸（jī）變,而作用於G2期時則誘發染色單體型畸變。給試驗的（de）大、小鼠腹腔注（zhù）入秋水（shuǐ）仙（xiān）素抑製細胞分裂時紡錘絲的形成,以增（zēng）加中期分裂相細胞的比例,並使染色體絲縮短、分散、輪廓清晰。在顯（xiǎn）微鏡下觀察染色體數目和（hé）形態。本方法特別適用於需考慮體內代謝活化後的染（rǎn）色（sè）體畸變分析。若有證據（jù）表明（míng）受試物或其（qí）代謝產（chǎn）物不能到達骨髓,則不適用於本方法，

應用範圍

應（yīng）用於科研、農業、衛生、教育、霧霾狀態可（kě）吸入顆粒染毒效果研究等各個領域

符合標（biāo）準：

GB/T 15670.16-2017《農藥登（dēng）記（jì）毒理學試驗（yàn）方法第16部分:體內哺乳（rǔ）動物骨（gǔ）髓細胞染色體畸（jī）變試驗》

二、試驗流程

1）動物選擇:常用齧齒類動物（大鼠或小鼠），通常每組至少5隻/性別。

2）給藥方案:

單次給藥:通常在采樣前12-48小時給（gěi）藥（覆蓋細胞周期）

多次（cì）給藥:若受試物代謝或毒性需重複暴（bào）露。

3.陽性對照:已知（zhī）致畸變劑（jì）（如環磷酰胺）

4.陰性對照:溶劑（jì）對照（如生理鹽（yán）水或DMSO）

5.采樣時間:通常在給藥後24小時和48小時采集骨髓細胞（bāo）（覆蓋不同細胞周期階段）

6.染色體製（zhì）備:

處死動物後取出骨髓（suǐ）細胞。

用秋水仙素（Colchicine）處理，阻斷細胞分裂於中期。低滲處理、固（gù）定、製片並染色（如Giemsa染色（sè））

7.鏡檢分析:

觀察至少200個中期分裂相/動物，記錄（lù）畸變類型和頻率，

區分染色體（tǐ）型畸變（如雙（shuāng）著絲粒（lì）體）和染色單（dān）體型畸變（biàn）（如斷裂）

三、結果判定

1）劑量相關性:畸（jī）變率隨劑量增加而升高。

2）統計學差（chà）異:試驗組畸變率顯著高於（yú）陰性對照組(如p<0.05)

3）生物（wù）學意義:需結合曆史對照數據和畸變類型綜合（hé）評估。